2025年，由中国科学院水生生物研究所负责起草，中国实验动物学会归口的《实验动物斑马鱼微生物与寄生虫等级及监测》T/CALAS 152-2025正式发布。

该标准适用于实验用普通级斑马鱼和无特定病原体级斑马鱼的病原等级及监测。同时，规定了普通级斑马鱼和无特定病原体级斑马鱼的病原等级、监测指标、程序、方法、结果判定和报告等。

01 标准编写背景

斑马鱼因性成熟周期短、繁殖可控、体外受精、体外发育、胚胎透明、管理方便等特点，被广泛应用于生命科学、健康科学、环境科学、水产科学等研究领域，是国际上应用范围最广的实验鱼类。我国斑马鱼研究虽起步较晚但发展飞速，研究体量全球占比自2020年起连续五年全球第一，是名副其实的斑马鱼研究大国。在此期间，不仅斑马鱼实验室数量快速增加，同行间品系交流的数量也急剧增长，带来了管理不规范、引入多种病原和病原快速传播等问题。与其同时，世界范围内都普遍存在缺乏病原分级与规范，缺少无特定病原体(SPF)斑马鱼等问题。我国于2020年底颁布《实验动物实验鱼质量控制》(GB/T 39649-2020)国家标准，但病原学等级及检测标准尚不够完善，也未对排除特定病原级斑马鱼进行规定。因此，开展实验斑马鱼微生物与寄生虫等级及监测标准研制工作，规范实验用普通级斑马鱼和SPF级斑马鱼的病原等级及监测，对于提高实验用斑马鱼质量、提高科研结果的准确性、确保实验人员安全以及应对公共卫生风险非常重要。

02 标准主要内容解读

1. 术语和定义

普通级斑马鱼 Conventional (CV) zebrafish，不携带所规定的对鱼和(或)人健康造成严重危害的病原体和动物烈性传染病病原体的斑马鱼。

无特定病原体级斑马鱼 Specific pathogen free (SPF) zebrafish，除普通级斑马鱼应排除的病原体外，不携带对科学实验干扰大的特定病原体的斑马鱼。

2. 斑马鱼分级病原检测项目

动物等级应排除的病原微生物检测要求主要检测部位

无特定病原级普通级细菌病原致病性嗜水气单胞菌virulent Aeromonas hydrophila (vAh)●内脏

海分枝杆菌Mycobacterium marinum●内脏

寄生虫病原多子小瓜虫Ichthyophthirius multifiliis●鳍、鳃

细菌病原鮰爱德华氏菌Edwardsiella ictaluri●脑、内脏

柱状黄杆菌Flavobacterium cloumnare●鳍、鳃

无乳链球菌Streptococcus agalactiae●脑、内脏

海豚链球菌Streptococcus iniae●脑、内脏

寄生虫病原嗜神经假洛姆虫Pseudoloma neurophilia●脑

注：● 必须检测指标，要求阴性

3. 病原选择及等级设定

病原选择和等级设定主要综合考虑以下7方面：①普通级和SPF级斑马鱼的定义;②国家现行法律法规的要求;③生物安全;④国内现有斑马鱼实验动物相关标准;⑤国内实验斑马鱼微生物和寄生虫病的流行病学情况;⑥检测方法的标准以及检测实验室的硬件条件;⑦适用性和前瞻性。

在国家水生生物种质资源库国家斑马鱼资源中心(以下简称CZRC)现有的斑马鱼流行病学调查数据中，国内实验室常见斑马鱼病主要表现有竖鳞病、烂鳃、烂尾、腹水、头顶穿孔、出血、溃疡腐皮、游动异常等。在已知病原中细菌性病原最为常见，占比75.8%，寄生虫类病原占比5.8%，未在实验室斑马鱼中发现病毒感染症状或检出病毒性病原。

在普通级病原选择中，主要考虑有较多报道且人鱼共感染的两种细菌病原：致病性嗜水气单胞菌(virulent Aeromonas hydrophila (vAh))和海分枝杆菌(Mycobacterium marinum)，以及经过正常鱼房管理和动物来源管理后不应出现在斑马鱼鱼房中的寄生虫病原多子小瓜虫(Ichthyophthirius multifiliis)。在SPF级病原选择中，主要考虑对实验鱼类生存危害较大和对实验数据产生严重干扰的四种细菌性病原和一种寄生虫病原：鮰爱德华氏菌(Edwardsiella ictaluri)，柱状黄杆菌(Flavobacterium cloumnare)，无乳链球菌(Streptococcus agalactiae)，海豚链球菌(Streptococcus iniae)和嗜神经假洛姆虫(Pseudoloma neurophilia)。

4. 检测方法

在本标准研制过程中，对实验斑马鱼病原的检测首先选择有国家标准或行业标准的检测方法。对于未见于已有相关标准的病原——鮰爱德华氏菌，或现有国家标准中仅有形态学检测，无分子检测方法的——嗜神经假洛姆虫，本标准使用由国家斑马鱼资源中心建立，经三家单位验证有效的检测方法。

03 总结

该标准的制定可推动不同地区、不同系统实验室所使用的斑马鱼质量稳定，增加实验结果的稳定性和可重复性，提高检测数据的认可度;从而促进斑马鱼相关研究领域的发展，为研究成果的产业化成果转化铺平道路。

来源：中国斑马鱼信息中心