目的 本研究拟建立一种灵敏快速的实时荧光定量 PCR(real⁃time quantitative PCR， qPCR)方法，用 于检测大、小鼠木糖葡萄球菌(Staphylococcus xylosus， S. xylosus)。>>>商务洽谈，点此处，在线咨询

方法 本研究选择特异性 gehM 基因片段作为靶 标合成了一套引物，建立了木糖葡萄球菌检测的 qPCR 方法。 对木糖葡萄球菌标准菌株和其他非目标菌进行特异 性分析。 将木糖葡萄球菌的 DNA 进行 10 倍稀释测定其灵敏度。 用送检的样本进行了临床应用并测序验证，同时 与培养法进行比较。

结果 仅木糖葡萄球菌出现特异性扩增曲线，而其他非目标菌未出现，表明设计的引物对木 糖葡萄球菌具有特异性，灵敏度为 100 fg / μL，组内和组间重复性均小于 3%。 共检测 60 份临床样品，有 5 份样品扩 增曲线为典型的 S 曲线，将该 qPCR 产物克隆测序并进行同源性比对，该序列与木糖葡萄球菌的同源性为 99.63%， 表明该样本木糖葡萄球菌核酸阳性，所检测样本阳性率为 8.3%，而培养法的阳性率为 6.7%，qPCR 方法阳性检出 率比培养法略高。

结论 建立的木糖葡萄球菌 qPCR 方法，具有快速、灵敏度高、特异性强和重复性好的优点，可用 于实验动物木糖葡萄球菌的检测。

阅读原文：木糖葡萄球菌实时荧光定量PCR检测方法的建立及其应用.pdf

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